Как берут иммуноферментный анализ крови

Как берут иммуноферментный анализ крови

Иммуноферментный анализ крови (ИФА) проводится для комплексной оценки защитных функций организма. В ходе проведения исследования определяется количество и свойства иммунных клеток, присутствие необходимых антител. ИФА анализ крови проводится для диагностики инфекционных, гематологических, аутоиммунных заболеваний, первичных и вторичных иммунодефицитов. Рассмотрим, что собой представляет анализ крови методом ИФА, и какие показания существуют для проведения данного исследования.

Анализ крови методом ИФА является лабораторным методом, с помощью которого в пробе крови определяют антитела или антигены. Данное исследование используется для выявления уровня иммуноглобулинов, иммунологических комплексов, гормонов.

Для назначения ИФА анализа крови существуют следующие показания:

  • диагностика инфекций, которые передаются половым путем – уреаплазма, микоплазма, хламидиоз, трихомонада, сифилис;
  • диагностирование вирусных заболеваний – цитомегаловирус, герпес, гепатиты, Эпштейн-Барр вирус;
  • определение уровня гормонов;
  • диагностика онкологических заболеваний;
  • определение иммунодефицита;
  • диагностирование аллергий;
  • предоперационное комплексное обследование перед пересадкой органов;
  • оценка эффективности терапии.

Принцип действия метода иммуноферментного анализа основан на определении в крови специфических белков-антител – иммуноглобулинов. Иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой человека при проникновении в организм антигенов (чужеродных микроорганизмов). Такие иммунные молекулы связываются с множеством инфекционных возбудителей в организме и нейтрализуют их.

Иммуноглобулины обладают важной характеристикой – специфичностью. Благодаря этому они могут связываться с определенным антигеном, образуя комплекс антиген-антитело. Во время проведения ИФА анализа крови именно этот комплекс определяют качественно и количественно.

Различают иммуноглобулины пяти классов. Но обычно определяют три класса – иммуноглобулины A, M, G. Данные антитела накапливаются в организме в разное время от момента инфицирования.

  • Иммуноглобулины класса М (IgM) появляются в крови самыми первыми на пятые сутки от момента заражения. Они находятся в организме на протяжении 5–6 недель, затем исчезают из кровотока. Антитела IgM указывают на острый период заболевания или обострение болезни при ее хроническом течении.
  • Примерно через 3–4 недели со времени заражения в крови появляются иммуноглобулины класса G (IgG). Они могут существовать в крови человека несколько месяцев или даже лет. Согласно расшифровке ИФА анализа крови, если в двух пробах крови, взятых последовательно через две недели, увеличено количество иммуноглобулинов IgG, говорят о текущей инфекции или реинфекции – повторном заражении той же инфекцией.
  • Иммуноглобулины класса А (IgA) можно выявить данным методом исследования через 2–4 недели после заражения или обострения инфекционной болезни. Из них только 20% циркулирует в крови, остальные находятся в секрете слизистых оболочек. Антитела IgA исчезают из кровотока через 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов. Исчезновение данных иммуноглобулинов означает излечение от инфекции. Если после окончания болезни определено присутствие в крови антител IgA, значит, заболевание перешло в хроническую стадию.

Для проведения анализа крови методом ИФА чаще всего используют кровь человека. Но исследовать также можно содержимое стекловидного тела, спинномозговую жидкость, околоплодные воды.

Проба крови для исследования берется у пациента из локтевой вены. Сдавать кровь рекомендуется натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не меньше 12 часов). Необходимо сообщить врачу, если пациент принимает лекарственные препараты, так как некоторые из них могут изменить результат анализа. На достоверность результатов исследования влияет прием алкоголя и наркотиков.

В бланке результата данного анализа указывается положительный (+) или отрицательный (-) результат определения каждого класса иммуноглобулинов.

Рассмотрим интерпретацию возможной расшифровки ИФА анализа крови.

  • Отрицательный результат IgM, IgG, IgA – отсутствие иммунитета к инфекции.
  • Отрицательный результат IgM, IgA и положительный результат IgG – постинфекционный или поствакцинальный иммунитет.
  • Отрицательный или положительный результат IgG, IgA и положительный результат IgM – острая инфекция.
  • Положительный результат IgM, IgG, IgA – обострение хронического инфекционного заболевания.
  • Отрицательный результат IgM и отрицательный или положительный результат IgG, IgA – хроническая инфекция.
  • Отрицательный результат IgM и не определяются IgG, IgA – выздоровление.

Анализ крови методом ИФА имеет много достоинств. Можно выделить основные из них:

  • относительно высокая точность (чувствительность);
  • возможность проведения ранней диагностики;
  • возможность отслеживания динамики инфекционного процесса;
  • высокий уровень унификации, что позволяет проводить массовые обследования;
  • небольшой промежуток времени, необходимый для получения результата анализа;
  • удобство в работе;
  • автоматизация всех этапов анализа;
  • относительно небольшая стоимость.

Недостатком метода ИФА является то, что иногда он дает ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Кроме технических ошибок при проведении исследования, причиной ложных результатов может быть ревматоидный фактор у пациента, наличие у него хронических болезней (при которых вырабатываются антитела), нарушения обмена веществ, прием некоторых лекарственных препаратов.

С помощью данного метода исследования крови определяют наличие в организме следующих паразитарных процессов:

  • аскаридоз;
  • трихинеллез – анализ проводят несколько раз, максимальный уровень антител определяется на 4–12 неделе после заражения;
  • цистицеркоз;
  • тениоз;
  • фасциолез – антитела определяются в острой стадии заболевания;
  • описторхоз – проводят дифференциальную диагностику между хронической и острой формой болезни;
  • лямблиоз;
  • висцеральный и кожный лейшманиоз;
  • амебиаз;
  • токсоплазмоз.

ИФА анализ крови на паразитов используется для выявления антигенов (паразитов и продуктов их жизнедеятельности) и антител (иммуноглобулинов). Иммуноглобулины вырабатываются в организме как антитела к антигенам. Специфичность данного метода при определении паразитов составляет 90%. С помощью этого анализа можно определить вид паразитов, их количество, и благодаря уровню антител проследить динамику развития процессов.

источник

Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время методы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия, но и количество паразитов в организме пациента.

Сейчас, как правило, пациентам предлагается пройти всего один тест — иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ — узкоспециализированный вид анализа, который проводится в условиях лаборатории. Анализ основан на реакции организма, обычно называемой «антиген-антитело».

Метод анализа, основанный на данном показателе, даёт точность в 99%. Это самый точный из известных сейчас методов. В практике почти не было случаев, когда такой анализ выдавал ложные результаты.

Этот метод позволяет выявить:

  • значительное количество инфекционных болезней, вызываемых паразитами;
  • наличие разных видов онкомаркеров;
  • в репродуктивной медицине — наличие белков, гормонов и пептидов, необходимых для оценки фертильности пациента;

Достоверность результатов теста зависит от нескольких факторов:

  • конкретная разновидность паразита;
  • количество паразитов в организме;
  • скорость их размножения.

Иммуноферментный анализ широко используется в диагностике самых разных заболеваний. Главная его ценность в том, что он позволяет с высокой точностью выявлять болезни, протекающие бессимптомно.

Как известно, такие болезни нередко бывает проблематично обнаружить на ранней стадии и, соответственно, вовремя начать лечить.

Какие заболевания диагностируют при помощи иммуноферментного анализа:

  • онкологические заболевания;
  • инфекции, передающиеся половым путём (ВИЧ, хламидиоз, сифилис, уреаплазмоз, герпес и другие заболевания);
  • туберкулёз, корь, токсоплазмоз, гепатиты и так далее;
  • гормоны щитовидной железы;
  • половые гормоны;
  • различные аутоиммунные расстройства;
  • аллергические реакции и непереносимость отдельных продуктов питания.

Данная процедура помогает выявить:

  • заражение организма бактериями и вирусами;
  • белковую основу;
  • глистные инвазии;
  • инородные тела.

Собственно, процедура ИФА складывается из двух частей:

  1. иммунный ответ;
  2. ферментативная реакция.

Суть принципа «антиген-антитело» заключается в том, что возбудитель заболевания или инородное тело, то есть антиген, поступает в организм постепенно вместе с источником заражения. Этот процесс вызывает так называемый иммунный ответ, предназначенный для защиты организма от инородных элементов.

Проявления такой защиты зависят от самого антигена и от симптомов вызванной им болезни. Данная схема и получила название «антиген-антитело».

Для большей достоверности диагностики вся процедура иммуноферментного анализа проводится только в лабораториях и медицинских центрах. С пробой крови взаимодействуют различные антигены и антитела.

С целью выявления как вида, так и количества паразитов в организме пациента применяется иммуноглобулин классов «А» и «Е», который реагирует на паразитарные инвазии.

Такой анализ должен выявить:

Иммунная реакция показывает биологические связи в молекулах клеток микробов, на наличие которых и проводится анализ. Иммунная реакция как таковая — это только один из компонентов комплексной программы ИФА, второй же компонент — это ферментная реакция.

Узнавание антигена происходит в процессе контакта клетки иммунной системы (иммуноцита) с чужеродной клеткой. Индивидуальные особенности антигенов служат для иммунной системы средством распознавания «свой-чужой».

Фактически, антитело:

  • Это просто молекула, расположенная на поверхности иммуноцита.
  • Эта молекула и используется для распознания чужеродных клеток.

Передача полученной информации об антигене происходит на клеточном уровне. Связь разрушается, если клетка иммунная, если же нет — организм запускает естественную защитную реакцию.

Современной науке известны 5 классов антител, иначе называемых иммуноглобулинами или белковыми структурами.

Для обозначения антител используются латинские буквы: A, D, E, G и M.

В результатах анализов эти обозначения выглядят так:

В первую очередь необходимо подготовить специальные планшеты из полистирола, которые содержат 96 лунок. Перед анализом стенки каждой ячейки обрабатывают адсорбирующим антигеном.

В обработанные ячейки капают сыворотку крови. Гомологичные антитела и антигены реагируют друг с другом, образуя прочные связи. Не прикрепившиеся тельца вымываются. Затем в лунки добавляются антитела иммуноглобулинов вместе с помеченными особым образом ферментными элементами.

Реагенты помечаются для облегчения идентификации антител в анализируемой сыворотке. Хромогенный элемент, который ускоряет реакцию и подкрашивает лунки, добавляется после промывания. Интенсивность окраски по сравнению с изучаемым ферментом показывает примерное процентное содержание антигена в пробе крови.

Затем лаборант использует оптическую жидкость, чтобы:

  • замерить концентрацию антител в лунках;
  • сравнить полученный результат с контрольной пробой, то есть эталоном;
  • подсчитать концентрацию антител при помощи специальной шкалы.

Для анализа на глистные инвазии используется особый вариант системы тестирования, со своим набором показателей нормы и отклонений от неё.

Забор сыворотки крови для иммуноферментного анализа проводится только в условиях лаборатории. Берут кровь из вены, удаляют оттуда элементы, способные повлиять на процесс анализа и точность его результатов. Сдают анализ утром на голодный желудок.

Качество и количество антител говорит о присутствии чужеродных элементов в организме пациента, в том числе болезнетворных микроорганизмов. Эти же признаки указывают на то, что в организме начался воспалительный процесс.

Пример расшифровки результатов ИФА:

Стадия заболевания IgA IgM IgG
Первичная (2 недели с момента инфицирования) +
Первичная (2,5-3 недели с момента инфицирования) + +
Первичная (3-4 недели с момента инфицирования) + + +
Обострение хронической фазы (2 недели с начала обострения) + +
Хроническая +/- +
Прошедшая (инфекция излечена) +
Выздоровление Титр снизился в 2-4 раза после успешного лечения Титр снизился в 4-8 раза спустя 1-1,5 месяца после успешного лечения
Результат отрицательный

Сам по себе количественный анализ, проведённый данным методом, ещё не даёт возможность точно диагностировать болезнь, назначить курс лечения и определить дозировку препаратов.

У всех методик тестирования, даже самых передовых и высокоточных, к сожалению, кроме преимуществ, есть и свои недостатки.

Преимущества иммуноферментного анализа:

  • Специализация метода диагностики;
  • Повышенная чувствительность этого метода;
  • Применение новейших технологий.

Чувствительность метода диагностики — это высокая вероятность обнаружить искомое, даже если его концентрация в исследуемом материале крайне мала.

Специфичность методики означает:

    высокую степень достоверности, то есть отсутствие риска получить ложный результат. Если результат положительный, то пациенту гарантировано, что обнаружен именно тот вид паразитов, от которого он страдает;
  • влияние на результат «человеческого фактора», то есть возможных ошибок лаборанта, сведено к нулю, что также способствует повышению точности.
  • Возможные недостатки данного метода анализа:

    1. Он предполагает определение природы болезни, то есть интуитивно «угадать» правильный диагноз в данном случае невозможно;
    2. Высокая стоимость анализа.

    В процедуре ИФА напрямую используется способность антител находить антиген, образуя связи с метками. Данный способ анализа считают промышленным, время ожидания результата составляет не более часа.

    Особая метка-субстрат проявляется после ферментации. Уровень антител соответствует доле антигенов в исследуемом биоматериале.

    Существует также дуоденальный (иначе — непрямой) метод исследования на паразитарные инвазии, который широко применяется, несмотря на высокую точность ИФА.

    Дуоденальный (непрямой) иммуноферментный анализ проводится в 2 этапа:

    1. Сначала сопоставляют помеченные антитела с искомыми антигенами;
    2. Применяют помеченные антитела к непомеченным, обнаруженным на предыдущей стадии.

    Таким образом достигается двойной контроль антигенов и антител, увеличивающий достоверность анализа.

    При непрямом ИФА в лаборатории антиген фиксируют на поверхности лунки, он образует связи с немеченной частью антител.

    Достоинства дуоденального метода:

    • Двойной контроль изучаемого биоматериала, что значительно повышает точность;
    • Повышенная точность и специфичность самого метода анализа.

    Однако, данный способ занимает много времени и предполагает некоторое количество дополнительных действий. Тем не менее, точность исследования настолько высока, что она оправдывает этот недостаток. По этой причине большинство врачей рекомендуют именно дуоденальный метод анализа.

    При наличии всего необходимого инструментария и расходных материалов можно будет получить результат уже через 2 дня после сдачи. Если в лаборатории есть услуга экспресс-анализа, то обработать пробу могут всего за 3-5 часов.

    Где можно сдать ИФА:

    • в государственной поликлинике;
    • в частных клиниках.

    Расценки на иммуноферментный анализ напрямую зависят от уровня цен в конкретной клинике, в среднем его цена составляет не менее 4000 рублей.

    Сведения, полученные в результате этого исследования, могут стать полезным вкладом в медицинскую науку, однако, пациенту следует помнить, что, поскольку стоимость иммуноферментного анализа так высока, разумнее будет доверить эту процедуру надёжной проверенной временем клинике.

    К сожалению, государственные медицинские учреждения не всегда бывают оборудованы по последнему слову науки. Необходимых приспособлений для качественного забора биоматериала и его обработки в районной поликлинике может и не быть.

    Итак, чем полезен для пациента иммуноферментный анализ крови:

    • позволяет обнаружить глистную инвазию ещё на ранней стадии;
    • как следствие этого, позволяет своевременно начать лечение;
    • устойчивость методов даёт возможность проводить анализ с равной точностью у детей и у взрослых.

    Иммуноферментный анализ демонстрирует не только качественный, но и количественный фактор, то есть не только указывает на сам факт наличия гельминтов в организме пациента, но и даёт возможность оценить их число.

    источник

    ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

    Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

    Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

    ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

    Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

    ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

    Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

    Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

    Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

    Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

    Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
    G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

    необходимы для иммунного ответа

    улучшают фагоцитоз,

    21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
    М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

    способны связать 5 молекул антигена,

    5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
    А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

    нужны для формирования раннего иммунитета

    Образование местного иммунитета

    4-5 Защита слизистых оболочек
    Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
    D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

    Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

    ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

    Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

    • вирусный гепатит;
    • ВИЧ-инфекция;
    • цитомегаловирус,
    • вирус Эпштейна-Барр,
    • вирус герпеса,
    • корь
    • краснуха,
    • туберкулез,
    • сальмонеллёз,
    • дизентерия,
    • клещевой энцефалит,
    • бактерии хеликобактер,
    • боррелиоз,
    • столбняк,
    • сифилис,
    • дифтерия,
    • лептоспироз,
    • хламидиоза,
    • уреаплазмоз,
    • микоплазмоз,
    • коклюш.

    Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

    • плоскими червями
    • аскаридами
    • гистолическими амебами,
    • печеночными тремадами,
    • лямблиями,
    • токсоплазмами,
    • трихинеллами,
    • двуусткой,
    • цестодозами.

    ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

    При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

    • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
    • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
    • стараться не допускать стрессов,

    Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

    источник

    С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.

    Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.

    Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.

    При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:

    • Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
    • Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
    • Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
    • Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.

    Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.

    Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:

    • Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
    • Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.

    В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:

    • Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
    • Трихинеллез;
    • Описторхоз в острой и хронической формах;
    • Лямблиоз;
    • Амебиоз;
    • Токсоплазмоз;
    • Лейшманиоз в любой форме.

    Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.

    При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.

    Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

    • За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
    • Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
    • Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
    • В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

    Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

    После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.

    Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.

    В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

    • Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
    • Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
    • Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
    • Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
    • Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
    • Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

    Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

    источник

    Среди методов анализа крови (ссылка на 3-ю статью в этом файле), позволяющих оценить способность организма противостоять инфекционным болезням и показывающих фазу болезни, важное место занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Проведение этого исследования позволяет всесторонне оценить деятельность защитной функции крови и выявить состояние иммунодефицита при инфекционных патологиях, также заболеваниях крови, аутоиммунных процессах, гормональных проблемах.

    Каким же образом удается охватить столько целей в одном анализе, и какие имеются показания для его проведения? Попробуем разобраться.

    Это лабораторное исследование, которое позволяет определять наличие специфических антител (защитных факторов крови белковой природы) к определенным антигенам (болезнетворным агентам). Среди антител первостепенное значение имеют иммуноглобулины, которые могут существовать в виде иммунокомплексов.

    Иммуноглобулины вырабатываются вследствие сложных нейрогуморальных реакций иммунитета человека, возникающих как ответная реакция на внедрение чужеродных антигенов. На каждый вид болезнетворного агента вырабатываются свои специфические антитела. Действуют они путем «связывания» антигена или патологического микроорганизма, образую комплексное соединение «антиген-антитело» с последующей нейтрализацией, ферментативным лизисом, реакциями фагоцитоза и выводом из организма.

    Обратите внимание: именно по наличию определенных комплексов методом ИФА определяется вид возбудителя или имеющегося у больного вредного вещества.

    Узнать базовые принципы функционирования иммунитет человека вы сможете, посмотрев данный видео обзор:

    Открыто и изучено 5 основных классов иммуноглобулинов – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE. роль остальных еще до конца не выяснена и она находятся в стадии научного исследования.

    Обратите внимание: наиболее важное в практической медицине значение имеют иммуноглобулины классов – А, М и G. Информативность определения основана на разных временных промежутках их появления, максимума и исчезновения.

    Рассмотрим этот вопрос более детально.

    Основная задача иммуноглобулина А (IgA) заключается в защитных функциях слизистых оболочек дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыделительной системы. При остром начале заболевания выявить их невозможно. Появляются эти защитные комплексы лишь со 2 недели начала заболевания, иногда позже. Основная масса иммуноглобулина А сосредоточена в слизистых тканях. Ориентировочно около 80%. Остальные антитела циркулируют в крови. Основная функция – обезвреживание и уничтожение микроорганизмов. После стихания острых проявлений заболевания количество этих иммуноглобулинов начинает уменьшаться и полностью уходит на сроке до 8 недель после начала болезни. Если IgA обнаруживаются в более поздние сроки, то это свидетельствует о хронизации процесса.

    Главными и первыми маркерами острой фазы развивающейся патологии являются иммуноглобулины класса М (IgM). Обнаруживаются они к 5 суткам начала недомогания. Определить их наличие в крови можно около 6 недель. Затем они начинают быстро исчезать.

    Остаточный иммунный ответ характеризует наличие в крови иммуноглобулинов класса G (IgG). Появление этих факторов в крови обнаруживается примерно через месяц после начала болезни. В дальнейшем они могут определяться в течение многих месяцев, лет и даже всю жизнь, выполняя защитную функцию от возврата (рецидива) болезни, а в некоторых случаях делая невозможным вторичное развитие патологии. Если же количество иммуноглобулина G начало вновь расти, то можно подозревать повторное заражение. Подобный вывод можно сделать путем проведения двух-трех проб, сделанных с промежутком в 2 недели.

    Иммуноглобулин Е (IgE) используется в практике паразитологии.

    Иммуноглобулин D (IgD) располагается на B-лимфоцитах, находится в небольшой концентрации у здоровых людей. После 10 года жизни достигает максимальных значений. Количество иммуноглобулина D увеличивается при беременности, у больных системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой, заболеваниями, вызванные иммунодефицитным состоянием.

    Определение антител к наличию в организме болезнетворных микробов, вызывающих:

    Имеется рост количества иммуноглобулинов и при глистных инвазиях.

    Диагностика проводится для обнаружения:

    • герпетических заболеваний;
    • группы вирусных гепатитов;
    • вируса Эпштейна-Барра;
    • цитомегоаловируса.

    При помощи ИФА можно определять наличие антител к 600 видов аллергенов, обнаруживать состояние иммунодефицита, проводить комплексное обследование перед трансплантологическими операциями, проводить комплексный анализ на предмет эффективности лечения.

    ИФА является дополнительным методом обнаружения онкологических клеток.

    Для иммуноферментного анализа в большинстве случаев используется кровь пациентов, иногда производят забор ткани стекловидного тела, жидкости спинномозгового канала, околоплодных вод.

    Кровь набирают через инъекционную иглу в шприц из локтевой вены. Исследование проводят натощак. Следует помнить, что прием некоторых медицинских препаратов может влиять на результат анализа. Перед сдачей крови необходимо воздержаться от курения, приема алкоголя. Исказить результаты может прием наркотических веществ.

    В случае отрицательных значений иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA можно говорить об отсутствии заболевания или его начальной фазе, также результат с минусами возможен при полном выздоровлении по прошествии значительного количества времени.

    Если IgA и IgM не обнаружены, а IgG проявляется положительно, то по всей вероятности речь идет о сформированном иммунитете после инфекционного заболевания, или после прививки.

    В случае высокого титра IgM при отрицательных значениях IgG, IgA можно делать вывод о наличии остро протекающего инфекционного заболевания.

    Одновременные положительные значения результатов иммуноглобулинов – IgA, IgM, IgG характерны для острой фазы рецидива имеющегося хронического заболевания.

    Для хронической инфекции, находящейся в фазе стихания процесса (ремиссии) ИФА показывает отрицательные значения иммуноглобулина M (IgM), при этом результат иммуноглобулинов G (IgG) и A (IgA) будет положительным.

    Главными достоинствами метода ИФА являются:

    • невысокая себестоимость анализа;
    • диагностическая специфичность, точность;
    • динамический контроль (повтор анализа для определения эффективности лечения и стадий заболевания);
    • возможность проведения массовых обследований в очагах инфекции;
    • скорость получения результата;
    • относительная простота анализа;
    • возможность использования информационных технологий в обработке;
    • безопасность и безболезненность для пациента.

    Главным отрицательным моментом исследования является возможность получения ложноотрицательных и ложноположительных данных. Причиной недоразумений могут стать технические недочеты, прием медикаментов, который может исказить картину.

    Обратите внимание: фальсифицировать результат анализа может нарушение обменных процессов в организме. Осторожность в выводах надо соблюдать при сочетании нескольких хронических процессов у больного.

    Возможность применения ИФА в диагностике паразитарных заболеваний определяется специфическим иммуноглобулином E (IgE), который имеет тенденцию к повышению именно при этой группе заболеваний. Кроме того, иммуноглобулин Е является маркером атопических реакций связанных с аллергическими процессами. В крови он находится в незначительных количествах. Основная его локализация – слизистые оболочки, базофилы, маркофаги. Главная функция этого белкового комплекса заключается в защите слизистых оболочек организма. Но в тоже время он является участником иммунных реакций, направленных против паразитов. Активацией IgE «заведуют» эозинофилы и макрофаги. Это важный факт в сопоставлении данных анализа при установлении диагноза болезни.

    ИФА применяется для обнаружения:

    • круглых гельминтов (аскарид, остриц);
    • острой и хронической формы описторхоза;
    • трихинеллеза;
    • наличия лямблий (как дополнительный анализ);
    • форм лейшманиоза;
    • амебиаза;
    • содержания токсоплазм;

    Важно: иммуноглобулины вырабатываются в организме в качестве антител к определенным антигенам. Поэтому даже при самой высокой специфичности анализа не исключаются погрешности в точности. При паразитарных заболеваниях процент вероятности составляет около 90%.

    В заключение необходимо отметить, что современная иммунология постоянно находится в стадии развития, поиска новых методов диагностики и лечения заболеваний.

    Степаненко Владимир, хирург

    65,324 просмотров всего, 2 просмотров сегодня

    источник

    Своевременное выявление инфекционных патологий помогает избежать развития тяжелых осложнений. Один из наиболее информативных методов диагностики – ИФА. Иммуноферментный анализ крови при беременности необходим для раннего выявления гематологических, аутоиммунных заболеваний, инфекций.

    ИФА анализ – что это такое? Это один из методов диагностики, определяет количество и качественное содержание различных антител и антигенов в биологическом материале.

    Что используют для иммуноферментного анализа крови при беременности:

    Принцип действия основан на способности организма синтезировать специфические антитела в ответ на проникновение чужеродных агентов. В результате образуется комплекс антиген-антитело, который выявляют при проведении ИФА.

    Метод ИФА считается одним из наиболее точных методов диагностики, его достоверность – более 90%. Анализ применяют для выявления различных серьезных заболеваний и опасных состояний.

    Какие патологии можно выявить:

    Иммуноферментный анализ крови при беременности позволяет оценить риск развития некоторых патологий почек, сердца, сосудов.

    Диагностику проводят для контроля уровня антител, которые могут вызвать у ребенка серьезные неврологические расстройства.

    Строгих противопоказаний для проведения ИФА нет. Но во время беременности часто наблюдается непрерывное изменение гормонов в крови, анализ приходится сдавать повторно несколько раз.

    Имуноферментный анализ крови не назначают после переливания крови, взятия пункции и биопсии, гемолиза, оперативного вмешательства.

    Чтобы получить достоверные результаты диагностики, к анализу ИФА нужно подготовиться.

    1. Кровь сдают только на голодный желудок. Последний прием пищи – за 12 часов до исследования.
    2. Непосредственно перед сдачей крови необходимо избегать активных и срезмерных физических нагрузок, постараться не нервничать. Обязательно нужно выспаться перед анализом.
    3. За 2 недели до диагностики необходимо прекратить прием антибактериальных и противовирусных лекарственных средств.

    Если для исследования необходим мазок со слизистых половых органов, то за 48 часов до сдачи анализа необходимо отказаться от половых контактов. Последнее мочеиспускание – минимум за 2 часа до забора биоматериала.

    В день сдачи иммуноферментного анализа крови при беременности нельзя принимать душ или ванну.

    Существует несколько методов в микробиологии для ИФА – прямой, непрямой, конкурентный, метод блокирования. Но в основе любого способа лежит алгоритм, который заключается в осуществлении иммунной и ферментативной реакции.

    1. Для исследования применяют специальные планшеты, которые содержат 96 ячеек. Перед анализом каждую лунку обрабатывают специальным антигеном.
    2. В ячейку капают биологический материал. Антитела и антигены вступают в реакцию, образуют прочные связи.
    3. В лунки добавляют антитела иммуноглобулинов и помеченные ферментные элементы.
    4. Используют оптическую жидкость для измерения концентрации антител.
    5. Подсчитывают концентрацию антител с помощью специальной шкалы.

    Непрямой метод считается более точным, поскольку в процессе изучения сыворотка проходит двойной контроль антител и антигенов.

    Во время ИФА выявляют наличие в биологическом материале иммуноглобулинов 3 типов – IgA, IgG, IgM, IgE, IgD.

    Кровь на ИФА – расшифровка:

    1. Иммуноглобулины типа M. Появляются в организме спустя 1-3 недели после начала болезни. Циркулируют в крови в течение 6-12 недель, затем их количество постепенно уменьшается. Наличие в крови IgM свидетельствует об остром первичном патологическом процессе, требуется срочное медикаментозное лечение.
    2. Иммуноглобулины типа G. Обнаружить их можно через 4 недели после заражения, присутствуют в организме несколько месяцев. Во время острого течения болезни титр их увеличивается на протяжении 1,5-2 месяцев. Наличие IgG свидетельствует о наличии иммунитета к патогенам, или о перенесенном недавно заболевании. Рост иммуноглобулинов этого типа свидетельствует о повторном заражении.
    3. Иммуноглобулины типа A. Появляются через 2-4 недели заражения, циркулируют в организме в течение 4 недель, по их количеству оценивают эффективность лечения. Снижение показателей свидетельствует о начале процесса выздоровления. Появление их в крови после завершения медикаментозного лечения – признак перехода болезни в хроническую стадию.
    4. Выявление иммуноглобулинов типа IgE применяют при выявлении аллергических и паразитарных патологий.
    5. Иммуноглобулины IgD в небольшом количестве присутствуют у здоровых людей. Увеличение их количества может свидетельствовать о наличии патологий соединительной ткани, бронхиальной астмы, иммунодефицитных состояний. Рост наблюдается и во время беременности.
    6. Присутствие в крови одновременно IgA и IgG – признак наличия в организме хронического патологического процесса.
    7. Наличие IgG и IgM свидетельствует об обострении хронической болезни, или о том, что первичное заражение произошло не позднее 2-3 месяцев до сдачи анализа.

    Если ни один из иммуноглобулинов не обнаружен, это означает отсутствие иммунного ответа.

    Положительный результат позволяет не только выявить патологию, но и определить стадию развития и характер течения болезни.

    Помимо вида антител, определяют их авидность – прочность связи антител с антигеном. Этот показатель позволяет оценить предполагаемый срок инфицирования.

    У иммунохимических анализов много преимуществ, но есть и недостатки.

    • невысокая стоимость и доступность;
    • возможность выявить заболевания на раннем этапе развития и контролировать динамику их развития;
    • минимальные сроки получения результатов.

    Недостатки – нельзя выявить конкретный тип возбудителя, нередко бывают ложноположительные результаты. Ложноположительный ответ может быть при заболеваниях соединительной ткани и суставов, диабете, воспалительных болезнях сердца.

    Именно у беременных нередко наблюдаются неспецифические ложноположительные результаты ИФА анализа, из-за высокой чувствительности тест-систем.

    Иммуноферментный анализ крови при беременности – достоверный и быстрый метод диагностики различных заболеваний. При этом он абсолютно безопасен для матери и ребенка.

    Его часто назначают беременным, но, чтобы избежать опасных патологий, делать его рекомендуют на этапе планирования зачатия.

    источник

    4



    Источник: art-mylife.ru


    Добавить комментарий